12 сентября 2025 года, Мизано. Утренние сессии для пилотов Moto3, Moto2, MotoGP и MotoE начались на скользком и грязном асфальте. Франко Морбиделли, после наказания Стюардами FIM за инциденты в Барселоне, пропустил старт сессии, но вскоре завоевал лидерство с временем 1:31.342. Второе место занял Фабио Куартараро, а его коллега по команде VR46 Фабио Ди Джианантонио замкнул тройку. Братья Маркесы также показали отличные результаты, попав в ТОП-5. Морбиделли завершил сессию с легким падением на Т9, что стало предвестником проблем для других гонщиков.
Пилоты Aprilia Racing, включая Марко Беццекки и Хорхе Мартина, уверенно прошли в Q2. Марк Маркес возглавил преквалификацию с результатом 1:30.480, приближаясь к рекорду, установленному Баньяей. Лука Марини занял 7-е место, выбив из ТОП-10 Жоана Зарко. Фабио Куартараро не смог удержаться в десятке, финишировав 12-м. Энеа Бастианини, дебютировавший на KTM, завершил день на 17-й позиции, а Августо Фернандес на экспериментальном Yamaha V4 стал 19-м, отстав от лидера всего на 1.2 секунды.
